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色譜分析儀的分析方法是什么樣的原理
發(fā)布時間:2020-10-29 點擊:2081

色譜分析儀的分析方法是怎么樣的,它是利用混合物中不同組分在兩相之間進行不同分配的原理,使混合物分離,并進行定性和定量分析的方法。

當流動相中所攜帶的混合物流過固定相時,會和固定相發(fā)生作用。由于混合物中各組分在性質和結構的差異,與固定相之間作用力的大小也有差異。因此在同一推動力作用下,不同組分在固定相中的滯留時間有長有短,從而按先后不同的次序從固定相中流出。

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色譜分析法的原理示意

按兩相狀態(tài),色譜法可以分為氣相色譜法、液相色譜法、超臨界流體色譜法。

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色譜分析法的分類

按溶質在兩相分離過程,可分為吸附色譜、分配色譜、離子色譜、體積排阻色譜、親和色譜和生物色譜法。

應用范圍

氣相色譜:沸點低于400℃的各種有機或無機試樣的分析

液相色譜:高沸點、熱不穩(wěn)定、生物試樣的分離分析

色譜法的優(yōu)缺點

(1)分離效率高 復雜混合物,有機同系物、異構體。手性異構體。

(2)靈敏度高 可以檢測出μg/g(ppm)級甚至ng/g(ppt)級的物質量。

(3)分析速度快 一般在幾分鐘或幾十分鐘內可以完成一個式樣的分析。

技術方法

色譜法常見的方法有:柱色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。

柱色譜

柱色譜法是最原始的色譜方法,這種方法將固定相注入下端塞有棉花或濾紙的玻璃管中,將被樣品飽和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端,以流動相洗脫。常見的洗脫方式有兩種,一種是自上而下依靠溶劑本身的重力洗脫,一種是自下而上依靠毛細作用洗脫。收集分離后的純凈組分也有兩種不同的方法,一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液,另一種方法是烘干固定相后用機械方法分開各個色帶,以合適的溶劑浸泡固定相提取組分分子。柱色譜法被廣泛應用于混合物的分離,包括對有機合成產物、天然提取物以及生物大分子的分離。

薄層色譜

薄層色譜法是應用非常廣泛的色譜方法,這種色譜方法將固定相圖布在金屬或玻璃薄板上形成薄層,用毛細管、鋼筆或者其他工具將樣品點染于薄板一端,之后將點樣端浸入流動相中,依靠毛細作用令流動相溶劑沿薄板上行展開樣品。薄層色譜法成本低廉操作簡單,被用于對樣品的粗測、對有機合成反應進程的檢測等用途。

氣相色譜

氣相色譜是機械化程度很高的色譜方法,氣相色譜系統(tǒng)由氣源、色譜柱和柱箱、檢測器和記錄器等部分組成。氣源負責提供色譜分析所需要的載氣,即流動相,載氣需要經過純化和恒壓的處理。氣相色譜的色譜柱一般直徑很細長度很長,根據結構可以分為填充柱和毛細管柱兩種,填充柱比較短粗,直徑在5毫米左右,長度在2-4米之間,外殼材質一般為不銹鋼,內部填充固定相填料;毛細管柱由玻璃或石英制成,內徑不超過0.5毫米,長度在數十米到一百米之間,柱內或者填充填料或者圖布液相的固定相。柱箱是保護色譜柱和控制柱溫度的裝置,在氣相色譜中,柱溫常常會對分離效果產生很大影響,程序性溫度控制常常是達到分離效果所必須的,因此柱箱扮演了非常重要的角色。檢測器是氣相色譜帶給色譜分析法的新裝置,在經典的柱色譜和薄層色譜中,對樣品的分離和檢測是分別進行的,而氣相色譜則實現(xiàn)了分離與檢測的結合,隨著技術的進步,氣相色譜的檢測器已經有超過30種不同的類型。記錄器是記錄色譜信號的裝置,早期的氣相色譜使用記錄紙和記錄器進行記錄,記錄工作都已經依靠計算機完成,并能對數據進行實時的化學計量學處理。氣相色譜被廣泛應用于小分子量復雜組分物質的定量分析。

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創(chuàng)想儀器GLMY?高效液相色譜儀

高效液相色譜

高效液相色譜(HPLC)是目前應用最多的色譜分析方法,高效液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進樣系統(tǒng)要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。HPLC應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。

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